项目背景：

安铎生物可饲养大小鼠超过5万笼，可提供平板架饲养、IVC独立饲养、EVC饲养等多种饲养条件，满足您对于不同实验的多样化需求；同时提供繁育服务、基因型鉴定，全方位保证小鼠的品系稳定及健康，在此基础上，公司长期提供标准化的多种疾病现货模型，欢迎您的咨询与选购

案例展示：

转基因繁育策略

转基因阳性小鼠与野生型小鼠交配 TG × WT

每一个 Founder 鼠分别与野生型（WT）小鼠（比如，常用的C57BL/6J）交配，获得的 F1子代；经过鼠尾基因型鉴定后，F1代中的阳性小鼠保留并再与野生型小鼠交配，获得 F2子代；F2代阳性小鼠保留再与野生型小鼠交配，获得 F3子代；以此类推。一个 Founder 鼠产生的子代，称为一个系。一般以 Founder 鼠的编号命名，比如：3号 Founder 获得的后代阳性小鼠，称为 3系

基因敲除/敲入繁育策略

杂合子与杂合子交配，获得纯合子+/- × +/- → -/-

对于采用 ES细胞打靶途径获得的基因敲除（KO）小鼠，在 Flp 重组酶去除 Neo 抗性基因以后，可以通过 KO 杂合子（+/-）之间相互交配的方式获得1/4KO 纯合子小鼠（-/-）、1/2 KO 杂合子小鼠（+/-）以及 1/4同窝野生型对照小鼠（WT）

条件性基因敲除繁育策略

获得 flox 纯合同时 Cre 阳性的小鼠（f/f；Cre-）× （f/+；Cre+） → f/f；Cre+

Flox 小鼠在去除 Neo 基因以后（CRISPR/Cas9 途径获得的 CKO 小鼠省略此步骤），获得仅含有两个 loxP 位点的 flox 杂合子小鼠（flox/+，可缩写成 f/+）。 flox 杂合子（f/+）小鼠与组织特异性或诱导型 Cre 阳性（Cre+）小鼠交配，获得 flox 杂合同时带有 Cre （f/+；Cre+）的小鼠，再与 flox 杂合子（f/+）交配，这样最终可以获得1/8的 flox 纯合且带有 Cre 的条件性基因敲除小鼠（f/f；Cre+）。

基因型鉴定Genotyping：

基因工程小鼠基因型PCR 鉴定的基本原则是利用基因工程小鼠基因组与野生型小鼠基因组的序列差异，以小鼠基因组DNA为模板进行PCR，并以凝胶电泳对比不同基因型特异产物的大小（一般差异在100bp以上），根据电泳条带差异来直接区分小鼠的不同基因型。

适用于：

Knockout（包括CRISPR介导片段敲除）

Conditional knockout

Knock-in（片段敲入）

Generation and genotyping of Tg/ICAM-1-knockout mice. (a) Scheme for the generation of Tg/ICAM-1-knockout mice: IL-4-Tg mice were crossed with purchased homozygous ICAM-1−/− mice to produce heterozygous Tg/ICAM-1+/− and non-Tg/ICAM-1+/− mice. The subsequent cross between heterozygous Tg/ICAM-1+/− mice and heterozygous non-Tg/ICAM-1+/− mice produced homozygous Tg/ICAM-1−/− mice (our testing group), non-Tg/ICAM-1−/− mice (our negative control), and the other littermate control mouse groups. (b) Genotyping of Tg/ICAM-1 KO mice: genotyping of ICAM-1 mice (homozygous and heterozygous) was performed according to the instructions from the ICAM-1−/− mice vendor. Photo shows the results of ICAM-1 genotyping, ICAM-1−/−, ICMA-1+/−, and ICAM-1+/+ (three mice for each group) resulted from our crossing. C1: PCR product using control DNA for ICAM-1−/−, C2: PCR product using control for ICAM-1+/+ (wild type), C3: PCR product without DNA template (negative control).

参考文献：

VCAM-1 blockade delays disease onset, reduces disease severity and inflammatory cells in an atopic dermatitis model.Immunol Cell Biol. Mar-Apr 2010;88(3):334-42. doi: 10.1038/icb.2009.107. Epub 2010 Jan 12.