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如何建立非开胸小鼠冠状动脉结扎和心肌梗塞模型?
发布时间: 2022-05-10 浏览量:

冠心病 (CHD) 是导致心血管疾病的最重要原因,由动脉粥样硬化斑块或血栓形成导致冠状动脉急性闭塞都可能导致心肌梗塞和心力衰竭。小鼠心肌缺血再灌注模型有助于为研究急性心肌梗死提供可靠的依据。

永久性左降支冠状动脉(left main descending coronary artery,LCA)闭塞引起心肌梗死,以及暂时性冠状动脉闭塞引起I/R损伤是最常用的两种模型。大多数研究人员仍使用需要使用开胸的方法,这会导致大量的组织损伤、手术相关死亡,并且可能相当耗时。现在有一种新型的不需要开胸的建立心肌梗死模型的方法。

模型建立:

(1) 小鼠用2%异氟烷麻醉后仰卧固定于手术台上,小鼠痛觉消失后,接上心电图机获得稳定的Ⅱ肢体导联。

(2) 消毒小鼠胸部毛发,在胸骨左侧第3、4肋间沿胸大肌边缘做一长1 cm左右切口,钝性分离皮下组织、胸大肌和前锯肌,用蚊式镊穿过第3、4肋间,快速挤出心脏。

(3) 在光源下,于左心耳下1~2 mm处找到冠状动脉左前降支(LAD),选用6-0丝线,结扎LAD,进针深度约1 mm,宽度1~2 mm,避免穿透心脏。结扎线打成活结,近针端剪短,远针端线头留3~4 cm于胸腔外。假手术组仅穿线不结扎。

(4) 结扎后可见结扎处以下心室壁变成暗红色,将心脏缓慢推入胸腔内。挤出胸腔内气体,胸壁切口作一荷包结打紧,关上胸腔,将结扎线头留于胸外用于冠脉再通。

(5) 结扎后5 min内密切观察心电图改变。

(6) 拿下麻醉面罩,小鼠会在2~3 min内苏醒,整个构建心肌缺血的时间控制在1 min内完成。

(7) 手术组小鼠分别于缺血15、30和45 min后,缓慢拉出结扎线,恢复心肌血流供应。

(8) 24 h后,记录心电图数据并进行伊文思蓝-TTC染色。

手术组小鼠存活率90%,缺血再灌注造模成功率86.7%。

如何建立非开胸小鼠冠状动脉结扎和心肌梗塞模型?(图1)
Rapid MI surgical method (Gao E, et al. Circ Res. 2010).

LAD结扎5 min后小鼠出现T波高耸,ST段抬高,QRS波增宽。随着再灌注时间延长,ST段逐渐回落。

如何建立非开胸小鼠冠状动脉结扎和心肌梗塞模型?(图2)

与经典的心肌梗死结扎模型方法相比,此方法明显可以在更少的时间内完成。这种更快的手术可以有效减少组织损伤和炎症反应,心律失常的发生率更低,术后恢复更快。